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干貨!加州鱸諾卡氏菌病困擾你已久?一線漁醫教你確診和防治

2018-11-1 20:49| 發布者: 一片云| 查看: 44576| 評論: 0|來自: 中國水產頻道

摘要: 中國水產頻道原創報道,認識諾卡氏菌病,是每一位加州鱸養殖戶必備的基本功。能侵害魚類的諾卡氏菌主要有3種,分別為星狀諾卡氏菌(N.asteroides)、鰤魚諾卡氏菌(N.seriolae)和殺鮭諾卡氏菌(N.salmonicida)。但據相關 ...
  中國水產頻道原創報道,認識諾卡氏菌病,是每一位加州鱸養殖戶必備的基本功。

  文/圖 順德活寶源生物科技有限公司 梁芝源 胡雄 王婷婷

  一、病原—鰤魚諾卡氏菌

  能侵害魚類的諾卡氏菌主要有3種,分別為星狀諾卡氏菌(N.asteroides)、鰤魚諾卡氏菌(N.seriolae)和殺鮭諾卡氏菌(N.salmonicida)。但據相關文獻和我們的檢測,從珠三角地區養殖加州鱸分離到的所有諾卡氏菌均為鰤魚諾卡氏菌(N.seriolae)。

  1、革蘭氏陽性菌,適溫25——28℃

  鰤魚諾卡氏菌,為一種革蘭氏陽性菌,隸屬細菌屆、放線菌門、放線菌綱、放線菌目、諾卡氏菌科。該菌以腐生為主,專性需氧,具有弱抗酸性,無運動性,最適溫度25——28℃,最適鹽度0——1.0%,適宜pH范圍5.8——8.5,最適pH為6.5——7.0。

  2、菌絲呈分枝桿狀,血平板中生長快

  鰤魚諾卡氏菌的菌絲呈桿狀、分枝,長約2——5μm,在宿主病灶處相互交錯、聚集成團(光學顯微鏡放大400倍清晰可見)。該菌能在血瓊脂平板、營養瓊脂培養基、腦心浸液瓊脂培養基等多種培養基中生長,其中,在血平板中生長相對較快,2——5天即可長出明顯菌落;而在腦心浸液瓊脂培養基生長較慢,需4——10天才能長出明顯菌落;菌落呈白色或淡黃色,砂粒狀,粗糙,邊緣不整齊,有時表面凸起形成褶皺。

  3、對氟苯尼考、強力霉素等相對敏感

  據相關研究,鰤魚諾卡氏菌具有多種表型和基因型,其分型與地域差異與宿主關系不大。Ismail等研究發現,α-葡萄糖苷酶陽性菌株對鹽酸土霉素有抗性,對紅霉素敏感;而α-葡萄糖苷酶陰性菌株對鹽酸土霉素敏感,絕大部分(97.9%)對紅霉素有抗性。據我們實驗室內部試驗,分離到的菌株均對氟苯尼考、強力霉素等相對敏感。

  二、流行特點

  1、4——11月份流行,15——32℃均可發病

  從發病季節看,珠三角地區每年4——11月流行,水溫15——32℃均可發病。其中,一齡魚以10——11月份發病最為嚴重,二齡魚以4——5月份最為嚴重;其他月份(12月——次年2月),諾卡氏菌病為潛伏狀態,一般不會發病死魚,但如果氣溫持續偏暖,也可引起持續少量死魚。

  2、規格大于22cm易發病

  從發病規格看,經我們確診的、自然感染諾卡氏菌病的加州鱸最小規格為全長22cm。大于此規格的加州鱸,均易感染諾卡氏菌病;而小于此規格的加州鱸,盡管也有部分病魚會出現類似諾卡氏菌病的常見癥狀如肝臟白斑等,但此類病魚觀察不到疑似諾卡氏菌菌絲,也分離、培養不到疑似致病菌。

  3、殺蟲、換水后發病率高,易復發

  從發病規律看,在流行季節,易感規格的加州鱸均可發病,在殺蟲、換水、過度投喂等節點后發病率極高。一旦發病,即使徹底治愈,也容易復發;而且,一旦當年發病,如果不徹底清塘,來年也發病的概率超過90%。

  三、病癥

  據相關文獻,鰤魚諾卡氏菌病的主要病理變化為內臟形成黃色或白色結節。但是,據我們檢測,諾卡氏菌病表現的癥狀十分復雜,不斷有新的病癥出現(如淺表性潰瘍,創口鮮紅);另一方面,也有一些疾病表現出與諾卡氏菌病類似的癥狀(如苗期肝臟白斑等)。

  1、活動狀態:病魚常見體色偏黑,遲鈍,乏力,浮游于水面。但也有部分病魚活力較強。

  2、體表:病魚體表常形成斑點狀出血,濃瘡,或者淺表性潰爛(患處鮮紅)。有時體表完好,并無異常。

  3、口腔:少數病魚口腔可見潰瘍斑。

  4、眼睛:部分嚴重感染的病魚可見眼睛膨大凸起。

  5、鰓:部分病魚鰓絲有大量白色結節,尤以秋冬季常見;但也有部分病魚鰓絲鮮紅,并無異樣。

  6、肌肉:部分病魚肌肉有白色結節。

  7、內臟:部分病魚有大量腹水;多數病魚的肝臟、脾臟、腎臟、心臟、鰾腔表面等有白色結節,部分病魚腸系膜也有白色結節;部分病魚在后腎處形成巨大的囊腫物。

  四、診斷要點

  正確診斷諾卡氏菌病,就要對諾卡氏菌病的癥狀有深刻、全面的認識,并能靈活應用光學顯微鏡,必要時借助實驗室設備。


  需要指出,隨著養殖環境的日益惡化以及盲目用藥,加州鱸諾卡氏菌病出現越來越多的新癥狀,在一線診斷時,應仔細、全面觀察病癥,并結合顯微鏡觀察情況綜合診斷,必要時聯系實驗室協助確診。

  此外,朝苗階段應注意肝臟白斑與諾卡氏菌病白色結節的區別:

  1、前者僅限于肝臟,內臟分離培養不到致病菌;

  2、后者癥狀較多,結節分布廣泛,內臟可分離培養到諾卡氏菌。

  養殖中后期注意愛德華氏菌病與諾卡氏菌病的區別:

  1、前者結節僅限于脾臟,腎臟常見整體腫大,鏡檢有時也可見結節,致病菌在腦心浸液培養基上生長相對較快,圓形,濕潤,邊緣整齊;

  2、后者結節分布廣泛,致病菌在腦心浸液培養基上生長緩慢,沙粒狀,粗糙,鏡檢呈山丘狀,邊緣不規則。

  五、預防方法

  廣義上,可借鑒魚病的三環理論,從改善水體環境、消滅病原菌、增強魚體體質和抗病力著手。

  1、改善水體環境。如合理使用微生態制劑,使水質清爽,確保溶氧充足,為加州鱸營造優良的水環境;

  2、消滅病原菌。如棄投冰鮮,切斷食源病原菌,定期使用全效底改、底毒凈等進行改底,減少底部致病菌數量;

  3、增強魚體體質和抗病力。投喂優質飼料,或定期內服護肝產品等增強體質,提高免疫力。

  具體可結合病原菌的生物學特性(弱抗酸性)以及經驗(殺蟲、換水或過度投喂等節點后發病率極高),從以下三個關鍵點預防諾卡氏菌病。

  1、合理調控pH,維持弱堿性(以下午pH8.3左右為宜)

  鰤魚諾卡氏菌具有弱抗酸性,在弱酸水體更容易獲得生態優勢。到了養殖的中后期階段,由于池塘底部積累了大量的魚類糞便等有機物,這些有機物在缺氧狀態下發酵產生酸性物質,加之池塘生物量大,呼吸作用強,池塘的水體和底泥往往偏酸,必需人為進行調控。調控pH的藥物有石灰、小蘇打(碳酸氫鈉)、有益菌等,具體方案應在專業人士的指導下使用。

  2、謹慎殺蟲或換水

  鰤魚諾卡氏菌是一種條件致病菌,在自然水體、底泥中廣泛存在。根據我們從一線收集到的信息,殺蟲、換水等節點后諾卡氏菌病的發病率明顯高于平時。其中緣由,殺蟲或換水會引起水質突變和魚體應激,造成魚體免疫力下降,給病原菌的入侵或潛伏魚體內的病原菌的大量繁殖帶來可乘之機。

  另一方面,據我們檢測,加州鱸養殖中后期階段直接由寄生蟲引起的病害較為罕見,盡管常能檢測到寄生蟲,但一般數量不多,絕大多數都有更重要的病因。因此,殺蟲務必謹慎,避免盲目殺蟲,如一定要殺蟲,也務必選擇在天氣穩定時并在專業人士的指導下進行。

  3、選好飼料,科學投喂,切忌過度投喂

  鰤魚諾卡氏菌以腐生為主,在腐敗變質的冰鮮雜魚中容易大量繁殖。要預防諾卡氏菌病,首先要選用不帶病原菌的優質配合飼料,切斷感染的食源途徑;其次,加州鱸攝食易受天氣、光照等影響,波動幅度較大,在投喂過程中應堅持定質定量的原則,維持相對穩定的投喂量,切忌過飽投喂。否則,一旦攝食過飽,加州鱸消化不良,體質亞健康,免疫力下降,很容易感染、爆發諾卡氏菌病。

  此外,據相關研究,回歸感染試驗,腹腔注射感染1周后即出現死亡病例,而口灌及浸泡感染約2周后才出現死魚,這表明鰤魚諾卡氏菌是一種慢性致病菌。因此,平時巡塘和投喂時應注意觀察魚群狀態和體表特征,一旦遇到游邊、遲鈍的病魚,應仔細、全面檢查有無諾卡氏菌病癥狀,及時發現,及時治療。

  六、治療方案

  在農業部公布的10種抗微生物漁藥中,強力霉素和氟苯尼考對諾卡氏菌的抑殺作用相對較好,但由于諾卡氏菌損傷免疫器官和藥物難以滲透肉芽腫組織觸殺病原菌等原因,治療僅在感染初期有良好效果。

  補充說明,部分養殖戶反映,內服驅殺孢子蟲藥——鹽酸氯苯胍有一定效果,能控制病情,具體機理不詳。

  七、梁工點評—加州鱸諾卡氏菌病

  圖1:示諾卡氏菌病-體表完好

  點評1:部分二齡病魚體表無任何異狀

  圖2:示諾卡氏菌病-體表斑點狀潰瘍、出血和眼睛腫大、凸起

  點評2:體表斑點狀出血是加州鱸諾卡氏菌病的典型癥狀之一,由于與教科書上的釘蟲病高度相似,容易被誤診為釘蟲病。實際上,加州鱸被釘蟲咬傷的地方很少呈鮮紅色。

  多種病因可致加州鱸眼睛腫大、凸起,諾卡氏菌病是其中之一,需取眼睛內積液鏡檢(400X)即可確診。

  圖3:示諾卡氏菌病-體表濃瘡

  點評3:加州鱸體表濃瘡由細菌感染引起,而且多數都是諾卡氏菌引起(膿液較粘稠),但也有部分由非諾卡氏菌引起(膿液較稀),取膿液鏡檢(400X)即可區分。

  圖4:示諾卡氏菌病-體表淺表性潰瘍、創面鮮紅

  點評4:屬虹彩病毒也可致類似的淺表性潰爛,但一般創面蒼白,且鏡檢(400X)無諾卡氏菌菌絲。

  圖5:示諾卡氏菌病-鰓白色結節

  點評5:目前,據我們的檢測和相關文獻,加州鱸鰓結節的病原僅有諾卡氏菌一種,鰓白色結節可作為判斷諾卡氏菌病的特征性癥狀;當然,極個別結節的除外。

  圖6:示諾卡氏菌病-口腔潰瘍灶

  點評6:偶見部分加州鱸病魚口腔出現潰瘍斑,取其中粘液鏡檢(400X)可見大量交錯成團的、細長的、分枝的諾卡氏菌菌絲。但由于不常見,在遇到類似癥狀時需全面檢測才能確診。

  圖7:示諾卡氏菌病-皮下白色結節

  點評7:加州鱸病魚體表有濃瘡,剪開可見白色膿漿,鏡檢(400X)可見大量諾卡氏菌菌絲。與孢子蟲囊孢較為相似,容易誤診。另,曾有學者報道加州鱸消化系統感染孢子蟲的病例,但據我們和同行檢測,加州鱸肌肉、肝脾腎等內臟部位均未明確檢出過孢子蟲。

  圖8:示諾卡氏菌病-肌肉白色結節

  點評8:常見加州鱸肌肉結節,且全部可觀察或分離到諾卡氏菌,此癥狀可作為判斷諾卡氏菌病的特征性癥狀。

  圖9:示諾卡氏菌病-內臟無結節

  點評9:有時,受藥物等的影響,部分諾卡氏菌病病魚內臟并無結節,僅表現為淺表性潰瘍。此類病魚在長期用藥的池塘中常見。

  圖10:示諾卡氏菌病-后腎表面白色結節

  點評10:常見癥狀,但有時也可見后腎表面附著一些黃色增生物,此類增生物為壞死的細胞,檢測不到疑似致病菌,鏡檢(400X)即可區分。

  圖11:示諾卡氏菌病-后腎巨大囊腫物

  點評11:后期常見癥狀,但其它一些致病菌如愛德華氏菌也可導致后腎腫大,與諾卡氏菌囊腫物較為相似,鏡檢(400X)即可區分。

  圖12:示諾卡氏菌病-頭腎大量白色結節

  點評12:加州鱸感染諾卡氏菌,首先頭腎會出現結節(鏡檢頭腎有無結節可作為早期診斷手段之一),但是需要指出,愛德華氏菌等也會導致類似的結節,診斷時應予以注意區分。

  圖13:示諾卡氏菌病-肝臟大量白色結節

  點評13:肝臟白色結節也是諾卡氏菌病的典型癥狀之一,但值得指出,苗期階段(全長8——15cm)加州鱸也常見肝臟白斑,而此類病魚普遍虹彩病毒陽性但檢測不到疑似致病菌。

  圖14:示諾卡氏菌病-脾臟大量白色結節

  點評14:脾臟出現白色結節是加州鱸諾卡氏菌病的典型癥狀之一,但是加州鱸感染愛德華氏菌病后也會出現脾臟結節,區別在于后者的白色結節僅限于脾臟和腎臟,而其他部位無。

  圖15:示諾卡氏菌病-內臟大量白色結節

  點評15:嚴重感染諾卡氏菌病的加州鱸,肝臟、脾臟、腎臟、心臟、腸系膜、鰾腔等均會出現白色結節,而其他病害的結節一般限于肝臟或脾腎等個別器官,這也可以作為判斷諾卡氏菌病的特征性癥狀。

  圖16:示諾卡氏菌病-心臟大量白色結節

  點評16:感染諾卡氏菌病的加州鱸心臟表面也可出現大量白色結節,但某些亞健康的加州鱸心臟表面會出現個別脂肪粒,診斷時應注意予以區別。

  圖17:加州鱸諾卡氏菌病-病灶大量諾卡氏菌絲(400X)

  點評17:鰤魚諾卡氏菌菌絲細長、分枝,相互交錯,結團生長,光學顯微鏡(400X)下特征非常明顯,與其它致病菌有顯著的區別。在診斷加州鱸諾卡氏菌病時,應充分利用光學顯微鏡,取病灶組織制成薄涂片觀察,以提高正確診斷率。

  圖18:加州鱸諾卡氏菌病-病灶大量諾卡氏菌絲,呈細長、分枝狀,革蘭氏染色陽性(400X)

  點評18:據現有文獻資料和我們實驗室檢測,危害加州鱸的致病菌中,屬于革蘭氏陽性菌的僅有鰤魚諾卡氏菌。結合革蘭氏染色,可進一步確診加州鱸諾卡氏菌病。但應注意革蘭氏染色假陽性現象。

  圖19:加州鱸諾卡氏菌病-病灶大量諾卡氏菌絲,呈細長、分枝狀,革蘭氏染色陽性(400X)

  圖20:鰤魚諾卡氏菌在腦心浸液培養基上的菌落形態

  點評20:鰤魚諾卡氏菌的生長速度偏慢,在腦心浸液瓊脂培養基上的菌落特征非常明顯,呈砂粒狀、粗糙、邊緣不規則,可作為判斷諾卡氏菌病的特征之一。

  圖21:鰤魚諾卡氏菌在腦心浸液培養基上的菌落形態(40X)

  點評21:光學顯微鏡下(40X),鰤魚諾卡氏菌呈棕灰色,山丘狀,邊緣不整齊,與其他水產致病菌菌落的差異非常大,也可作為確診諾卡氏菌病的特征性依據。

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